避免冰晶與脫落!櫻花OCT包埋劑的正確使用流程與常見誤區
更新時間:2026-02-04 點擊次數:46次
櫻花OCT包埋劑是病理切片制備中的核心輔助材料,主要用于冷凍切片時固定組織樣本,憑借良好的黏性、低溫穩定性及與組織的相容性,保障切片完整、形態清晰,廣泛應用于臨床病理診斷、科研組織學分析等場景。冷凍切片中,冰晶形成與切片脫落是兩大高發問題,會嚴重影響染色效果與病理觀察,因此規范
櫻花OCT包埋劑的使用流程、規避常見誤區,是提升冷凍切片質量的關鍵。
櫻花OCT包埋劑的正確使用流程,需圍繞“樣本預處理-包埋操作-冷凍固化-切片銜接”四大步驟,重點防控冰晶與脫落隱患。第一步,樣本預處理,需先將新鮮組織修剪至合適大小(一般不超過5mm×5mm×3mm),快速用生理鹽水沖洗去除血液、黏液等雜質,避免殘留污染物影響包埋黏性;若組織含大量水分,需用濾紙輕輕吸干表面水分,減少冰晶形成的源頭。同時,包埋劑需提前回溫至室溫,避免低溫狀態下倒入時產生氣泡,氣泡會導致組織固定不牢,增加脫落風險。
第二步,包埋操作,選用適配的包埋盒,先倒入少量OCT包埋劑鋪底,厚度約1-2mm,待底部包埋劑初步凝固后,將處理好的組織樣本平穩放入,調整樣本姿態(確保待切片面朝下),再緩慢注入包埋劑,直至全數覆蓋樣本,避免用力傾倒產生氣泡,氣泡會導致組織與包埋劑貼合不緊密。第三步,冷凍固化,將包埋盒放入-20℃冷凍臺或液氮中,靜置15-20分鐘,確保包埋劑與樣本全數凝固,固化速度需均勻,避免快速冷凍導致組織內部形成大量冰晶,也需防止固化不全導致切片時脫落。
第四步,切片銜接,固化完成后,將包埋塊從包埋盒中取出,固定在冷凍切片機上,調整切片厚度(常規3-5μm),切片前需用冷凍切片機低溫預冷5分鐘,確保包埋塊與切片刀溫度適配,減少切片時的應力損傷,避免脫落。切片后及時將切片轉移至載玻片上,快速固定,完成后續染色流程。
使用過程中需重點規避三大常見誤區,杜絕冰晶與脫落問題。誤區一,直接用低溫包埋劑包埋新鮮組織,低溫包埋劑會導致組織水分快速凝固,形成大量冰晶,破壞組織細胞形態,正確做法是將包埋劑回溫至室溫后使用。誤區二,組織未脫水或表面有水分就包埋,水分會降低包埋劑黏性,導致切片脫落,同時加劇冰晶形成,需吸干組織表面水分。
誤區三,冷凍固化不全或過度冷凍,固化不全會導致包埋塊松軟、切片脫落;過度冷凍會使包埋塊變脆,切片易碎裂,需嚴格控制冷凍溫度與時間。此外,包埋劑反復凍融易降低黏性,需密封保存,避免多次取用后反復凍融;包埋時避免包埋劑過少,需確保全數覆蓋樣本,形成穩定的支撐結構。
規范櫻花OCT包埋劑的使用流程,做好樣本預處理與冷凍固化管控,規避常見使用誤區,是避免冰晶形成、防止切片脫落的核心。正確使用可較大化發揮其固定與支撐作用,保障冷凍切片質量,為病理診斷與科研分析提供精準的組織形態依據。
